研究基因在代謝通路或某些特定疾病發(fā)生過程中的功能,對于疾病機理研究及藥物研發(fā)具有非常重要的意義。新一代基因編輯技術(shù)CRISPR以其操作簡單和通用的獨特優(yōu)勢,成為開展正向遺傳學篩選實驗強有力的工具。利用CRISPR技術(shù)建立可能與某類功能相關的突變體庫,通過功能性篩選和富集、PCR擴增及深度測序分析,確認與這類功能相關的基因。
泓迅生物利用獨創(chuàng)的“GPS”(Genotype,Phenotype,Synotype)平臺,提供基于CRISPR sgRNA文庫的一站式基因功能篩選服務。我們專利的Syno?合成技術(shù)平臺,可以快速高效地實現(xiàn)sgRNA文庫構(gòu)建,并包裝成慢病毒混合文庫后轉(zhuǎn)染細胞。結(jié)合高通量/高內(nèi)涵篩選平臺,利用控制細胞存活、結(jié)合免疫染色、流式細胞術(shù)等手段篩選得到所需細胞,最終通過測序等方法推斷出發(fā)揮作用的靶基因。
服務項目 | 服務詳情 | 周期 |
---|---|---|
sgRNA設計 |
針對特定基因分類進行g(shù)RNA序列設計 每個基因設計3-6條sgRNA |
1-2周 |
芯片合成 | 將所設計的所有sgRNA及陰性對照合成在一張芯片上 | 3-4周 |
sgRNA文庫構(gòu)建 | 將sgRNA構(gòu)建到客戶的目標載體上 | 2-3周 |
文庫質(zhì)粒大抽 | 根據(jù)發(fā)貨量進行轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒抽提 | 1周 |
文庫質(zhì)檢及NGS驗證(可選) |
1. 克隆覆蓋倍數(shù)必須大于100倍 |
2-3周 |
病毒包裝(可選) | 慢病毒包裝,病毒滴度: 108TU/ml | 2-3周 |
總計 | 11-16周 |