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通過逐步去除多肽序列兩側(cè)的氨基酸來確定表位的最小范圍,鑒定與活性相關(guān)的最少氨基酸序列。
以20種天然氨基酸通過鳥槍法(shotgun approach)隨機替換特定氨基酸殘基,從而生成大量不同的多肽序列。廣泛用于多肽篩選,以發(fā)現(xiàn)新的活性多肽或靶標(biāo)區(qū)域。
系統(tǒng)地將多肽序列中的特定位點用其他氨基酸逐一替換,以優(yōu)化多肽序列,確定特定位置的最佳氨基酸。
通過Ala依次替代多肽中的每個氨基酸,鑒定各位點對多肽整體結(jié)構(gòu)、功能及生物活性的影響,有助于識別關(guān)鍵氨基酸。
對原有多肽氨基酸序列進行內(nèi)部置換,作為陰性對照來確認(rèn)關(guān)鍵序列,廣泛用于靶向分子探針篩選和新蛋白功能發(fā)現(xiàn)。
主要用于篩選線性或連續(xù)性表位,通過逐步從蛋白質(zhì)的N端向C端截取設(shè)計多肽,以發(fā)現(xiàn)與特定生物活性相關(guān)的表位。
純度范圍:粗品、脫鹽和轉(zhuǎn)鹽,>70%、>75%、 >80%、 >85%、 >90%、 >95%、 > 98%、>99%。
合成長度:1-30 AA。
交付周期:2-3周,最快1-2周。
在使用多肽文庫進行篩選時,需要注意實驗設(shè)計的合理性、多肽的純度和濃度、篩選條件的優(yōu)化以及數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確分析。
多肽修飾可以改善多肽的理化性質(zhì),如增加水溶性、提高穩(wěn)定性、增強生物活性和延長體內(nèi)作用時間。常見的修飾包括C末端、N末端、中間殘基和環(huán)化修飾。